解放双手加快科研：KingFisher PlasmidPro 引颈质粒纯化主动化新时期【有奖问卷】

　　正在分子生物学推敲和生物制药界限，高质料的质粒 DNA 是很众下逛利用的要害原料，搜罗 mRNA 合成、疫苗开辟、基因调治和病毒载体分娩等。然而，古板的柱式纯化技巧不单耗时耗力，还需求众次离心和真空过滤设施，成为科研做事流程中的瓶颈。针对这一离间，Thermo Scientific™ KingFisher™ PlasmidPro 全自愿大周围质粒提取仪供应了一种

　　KingFisher PlasmidPro的最大亮点正在于其全自愿化的操作流程。与古板柱式纯化技巧比拟，它只需三个纯洁设施：插入预分装卡盒、倒入止宿教育菌液、按下启动键。一共进程无需人工过问，75分钟内即可完毕质粒纯化（图1）。这种高效的做事流程不单减省了珍贵的岁月，还明显低落了人工操作偏差的危机。

　　图1. 手动纯化与自愿化流程比照。KingFisher PlasmidPro 的纯洁操作完毕了一律无需手动过问的质粒纯化

　　KingFisher PlasmidPro 正在质粒纯化的产量和纯度方面发扬卓绝。实践数据显示，纯化后的质粒产量与古板手动纯化技巧相当（图2A）。完全样品的A260/A280比值1.8，A260/A230比值2.0(图2B)，知足下逛利用对证粒纯度的庄敬请求。

　　图2. KingFisher PlasmidPro 提取四种分别巨细质粒的纯化产量和纯度剖释（支配滑动查看）

　　超螺旋质粒是很众高端利用 (如基因调治和疫苗开辟) 的要害。通过琼脂糖凝胶电泳剖释，KingFisher PlasmidPro 纯化的质粒中超螺旋占比进步80%，且无可睹的 RNA 或基因组 DNA 污染(图3A和3B)。这一结果解说自愿化纯化体例可以供应与古板手动技巧相媲美的高质料质粒 DNA。

　　内毒素和宿主基因组 DNA 残留是影响质粒利用安静性的厉重成分。KingFisher PlasmidPro 提取的质粒内毒素含量低于0.1 EU/μg 质粒(外1)，一律切合高级转染级准绳。同时，qPCR 剖释显示，PlasmidPro 提取的纯化质粒中的残留基因组 DNA 含量与手动纯化的残留量相当(图4)。

　　为了验证纯化后质粒 DNA 的功效性，操纵 HuH-7 细胞实行了转染实践。结果显示，通过 KingFisher PlasmidPro 纯化的质粒 B（含 SEAP 呈报基因）和质粒 C（含荧光素酶基因）正在转染效能上与手动纯化的质粒相当（图5），一律合用于哺乳动物细胞转染实践。

　　图5. 操纵 KingFisher PlasmidPro 纯化的质粒与手动纯化质粒的转染效能比照。纵轴数值外现相对待手动纯化质粒 (设定为100%) 的转染效能

　　KingFisher PlasmidPro 全自愿化大周围质粒提取仪通过全自愿化、无离心、无内毒素的纯化流程，为推敲职员供应了一种高效、牢靠的质粒制备管理计划。无论是用于卵白分娩、mRNA合成，仍是疫苗开辟和基因调治，KingFisher PlasmidPro 都是科研职员值得相信的伙伴。